keumuman
Imunisasi ulang adalah tes laboratorium yang memungkinkan identifikasi dan tipifikasi gamma globulin hadir dalam sampel biologis.
Secara rinci, analisis ini memungkinkan untuk mempelajari - dalam darah atau urin pasien - kelas imunoglobulin (IgA, IgG, IgM, IgE atau IgD) dan jenis rantai cahaya kappa atau lambda, sesuai dengan mobilitas elektroforetik spesifik mereka . Selanjutnya, untuk identifikasi gamma globulin yang terlibat, imunisasi ulang melibatkan inokulasi antigen spesifik untuk fragmen atau antibodi yang sesuai ( anti-imunoglobulin antiserera ): adanya perubahan yang diduga dikonfirmasi oleh formasi dari endapan, terlihat dengan mata telanjang atau mikroskop.
Informasi ini sangat penting untuk menegakkan, khususnya, diagnosis patologi sel plasma (gammopathies atau diskrasia sel plasma). Perbaikan imun sangat berguna untuk evaluasi dan pemantauan multiple myeloma, makroglobulinemia Waldenström dan amiloidosis primer (juga disebut amiloidosis rantai ringan).
apa
Perbaikan kekebalan (atau immunoelectrophoresis, juga disingkat dalam akronim IFE ) adalah teknik yang dapat menentukan apakah dan kelas imunoglobulin mana (IgG, IgM, IgA, IgD, IgE) atau jenis rantai cahaya kappa atau lambda, yang hadir dalam kelebihan atau cacat dalam serum darah dan urin pasien.
Rantai cahaya kappa dan lambda menjadi ciri komponen monoklonal, yaitu antibodi dengan struktur kimia yang sama identik.
Perbaikan Serum dan Imunisasi Urin: kapan diindikasikan?
Displasia plasmacellular atau gammopathies adalah kelompok gangguan heterogen etiologi yang tidak diketahui ditandai oleh:
- Proliferasi klon sel B yang tidak proporsional;
- Kehadiran dalam serum dan / atau urin dari jenis imunoglobulin (atau subunit polipeptida), secara struktural dan elektroforesis homogen ( monoklonal ).
Biasanya, diskrasia sel plasma didiagnosis menggunakan elektroforesis protein serum dan urin, diikuti dengan imunofiksasi serum (IFE).
Pada saat yang sama, tes darah dapat dilakukan untuk mengukur konsentrasi total imunoglobulin (IgG + IgM + IgA).
Untuk mempelajari lebih lanjut: Immunoglobulin - Apa itu, Bagaimana mereka diukur dan Nilai Referensi »Imunisasi: prinsip dasar
Perbaikan imun adalah pemeriksaan yang melibatkan dua fase (pertama elektroforesis dalam agarosa gel, kemudian imunopresipitasi dengan antiserum spesifik ).
Langkah pertama dari imunofiksasi adalah sama dengan yang dilakukan oleh ELECTROPHORESIS protein (atau protidogramma), oleh karena itu perlu diingat beberapa konsep:
- Elektroforesis adalah analisis laboratorium yang memungkinkan untuk menentukan jumlah protein yang ada dalam serum darah atau dalam sampel biologis lainnya dan, untuk setiap fraksi, mengungkapkan apakah ada anomali dalam hal kualitas. Secara khusus, pemeriksaan ini memungkinkan pemisahan protein menjadi lima kelompok: albumin, alpha 1 globulin, alpha 2 globulin, beta globulin dan gamma globulin ; yang terakhir diselidiki lebih spesifik dengan imunoterapi.
- Elektroforesis adalah metode pemisahan berdasarkan kecepatan migrasi berbeda dari partikel bermuatan listrik, melalui solusi dan media pendukung lembam, di bawah pengaruh medan listrik, yang dihasilkan oleh arus searah. Dalam praktiknya, pemeriksaan mengeksploitasi muatan listrik dan massa molekul protein yang ada dalam sampel pasien. Di bawah dorongan medan listrik, makromolekul ini bermigrasi dan "dikelompokkan" menurut jenisnya, merespons stres dengan cara yang khas. Hasilnya ( penelusuran elektroforesis ) terdiri dari berbagai puncak dan kurva, yang sesuai dengan fraksi protein. Biasanya, puncak pertama, lebih tinggi dan lebih sempit, adalah albumin ; untuk mengikuti, kami mengamati puncak globulin, jauh lebih rendah dari albumin. Peningkatan atau penurunan amplitudo dan intensitas puncak yang terbentuk di jalur menunjukkan adanya protein yang lebih besar atau lebih kecil di setiap kategori; semakin banyak protein yang ada dalam pita, semakin tinggi pula puncaknya. Dalam kasus gamma globulin, jika seseorang ingin mengetahui jumlah masing-masing kelas yang berbeda (IgA, IgM, IgG dll.) Maka perlu untuk menggunakan dosis tunggal. Secara umum, semakin banyak gamma globulin hadir dalam sebuah band, semakin tinggi pula puncaknya; tingginya sesuai dengan jumlah total protein yang termasuk dalam kategori tertentu.
IMMUNOFISSATION menyediakan:
1) Elektroforesis Gel Agarosa : sampel pasien (serum atau urin) disimpan pada strip elektroforesis, yaitu dukungan untuk migrasi (biasanya, gel agarosa). Melalui penerapan medan listrik, yang dihasilkan oleh arus searah, pemisahan dalam pita yang berbeda diperoleh. Dalam praktiknya, setiap jenis gamma globulin yang ada dalam campuran (yaitu dalam sampel pasien) bermigrasi berdasarkan massa molekul dan muatan listrik. Mobilitas elektroforesis gamma globulin yang berbeda memungkinkannya untuk mengidentifikasi mereka (masing-masing bertepatan dengan pita tertentu dalam jalur elektroforesis) dan untuk mengamati anomali apa pun.
2) Imunopresipitasi dengan Antisera Spesifik (Fiksasi) : antigen spesifik untuk antibodi atau fragmen spesifik ditambahkan secara individual ke setiap strip elektroforetik (anti-IgG, anti-IgA, anti-IgM, anti-cahaya kappa atau anti-rantai) rantai cahaya lambda). Jika terdapat protein monoklonal, interaksi antigen dengan antibodi yang sesuai akan menghasilkan pita sempit (ini berarti bahwa hasilnya positif) dan pembentukan endapan, terlihat oleh mata telanjang atau mikroskop. Akhirnya, sampel diproses (yaitu dicuci dan diwarnai) untuk menghilangkan protein yang belum diendapkan, untuk mendapatkan pengeringan gel dan melanjutkan dengan pembacaan hasil.
Mengapa ini berjalan?
Apa Imunifikasi untuk?
Imunisasi serum adalah pemeriksaan yang diindikasikan untuk mendiagnosis atau memantau penyakit yang ditandai oleh perubahan gamma globulin, terutama bila menyangkut produksi komponen monoklonal ( gammopathy monoklonal ).
Untuk mempelajari lebih lanjut: Monoclonal Gammopathies - Apa dan mana yang »Imunisasi berguna dalam kasus dugaan diskrasia sel plasma dan merupakan dasar untuk studi MIELOMA (dan patologi terkait) dan MGUS (akronim untuk "gammopathies monoklonal dengan makna yang tidak pasti").
Tes ini juga memungkinkan kami untuk mengevaluasi makroglobulinemia Waldenström dan amiloidosis rantai ringan ( AL ).
Imunisasi: kapan pemeriksaan ditentukan?
Indikasi untuk perbaikan kekebalan adalah setelah bukti klinis atau laboratorium yang meningkatkan kecurigaan perubahan antibodi monoklonal atau imunoglobulin dalam serum atau urin.
Sebagai contoh, pemeriksaan ini memungkinkan untuk memperdalam hasil elektroforesis seroprotektif atau urin: ketika dalam penelusuran elektroforesis, pita-pita yang sesuai dengan gamma globulin menyimpang dari normalitas, imunofiksasi mengidentifikasi protein mana yang diubah, dalam hal kuantitas dan kualitas.
Singkatnya, perbaikan imun serum dapat ditentukan:
- Dalam kasus di mana tes laboratorium lain memberikan hasil yang abnormal, dalam hal tidak adanya atau jumlah yang lebih kecil dari protein plasma sehubungan dengan norma;
- Ketika adanya penyakit yang ditandai dengan produksi komponen monoklonal diduga, seperti:
- Multiple myeloma dan variannya;
- Makroglobulinemia Waldenström;
- amiloidosis;
- Ketika pasien mengalami gejala dan tanda yang menunjukkan adanya gamopati monoklonal atau mieloma multipel, seperti:
- Nyeri tulang;
- anemia;
- Mudah lelah;
- Infeksi berulang;
- Fraktur yang tidak dapat dijelaskan.
Dalam kasus multiple myeloma, elektroforesis protein dan perbaikan kekebalan cukup bermanfaat juga untuk memantau perkembangan penyakit (tindak lanjut).
Imunisasi: pada sampel mana yang dapat dilakukan?
Sampel biologis yang dapat dikenakan imunisasi terutama adalah:
- Serum (perbaikan imun serum);
- Urin (imunologisasi urin);
- Minuman keras * (perbaikan kekebalan minuman keras).
* Catatan : CSF atau cairan serebrospinal adalah cairan yang meresap dan melindungi otak, sumsum tulang belakang, saraf kranial, dan akar tulang belakang.
Nilai normal
Hasil NEGATIF serum dan imunoterapi ulang urin untuk gamma globulin monoklonal atau poliklonal dianggap NORMAL .
Gamma globulin
Gamma globulin merupakan 9-20% dari total protein plasma.
- Nilai referensi Gamma globulin : 0.9-1.4 g / dl
Mengenai konsentrasi total imunoglobulin ( IgG + IgM + IgA ), diyakini bahwa nilai antara 600 dan 2300 mg / dl adalah normal.
- Nilai referensi Immunogobulin dalam serum :
- IgA : 90-400 mg / dl
- IgG : 800-1800 mg / dl
- IgM : 60-280 mg / dl
- IgD : 0, 3-0, 4 mg / dl
- IgE : 20-440 mg / dl
Catatan : interval referensi ujian dapat sedikit berbeda tergantung pada usia, jenis kelamin dan instrumentasi yang digunakan di laboratorium analisis. Karena alasan ini, lebih baik untuk berkonsultasi dengan rentang yang terdaftar langsung pada laporan. Harus juga diingat bahwa hasil analisis harus dinilai secara keseluruhan oleh dokter umum, yang mengetahui riwayat medis pasien.
Nilai Tinggi - Penyebab
Peningkatan gamma globulin dapat:
- Poliklonal, jika produksi imunoglobulin heterogen, yaitu semua komponen gamma globulin - yang diproduksi atau diturunkan dari sel plasma yang berbeda - dipengaruhi oleh peningkatan;
- Monoklonal, ketika gamma globulin diproduksi atau berasal dari satu jenis (klon) sel plasma.
Peningkatan globulin gamma poliklonal dapat dikaitkan dengan:
- Penyakit radang kronis;
- Artritis reumatoid;
- Lupus erythematosus sistemik;
- Penyakit hati kronis (seperti hepatitis dan sirosis);
- Infeksi akut dan kronis;
- Imunisasi terbaru;
- Beberapa penyakit tumor.
Nilai tinggi gamma globulin monoklonal dapat mengindikasikan, sebaliknya, keberadaan:
- Beberapa neoplasma dan radang kronis;
- Multiple myeloma;
- limfoma;
- Makroglobulinemia Waldenström.
Kelebihan gamma globulin disebut hypergammaglobulinemia, sementara kekurangan dikenal sebagai hipogammaglobulinemia .
Nilai Rendah - Penyebab
Pengurangan gamma globulin dapat menunjukkan adanya berbagai penyakit pada sistem kekebalan tubuh berdasarkan genetik, termasuk agammaglobulinemia, atau defisiensi imun sekunder (misalnya AIDS, gagal ginjal, sepsis akut, dan sindrom Cushing).
Penurunan nilai gamma globulin juga tergantung pada penggunaan obat sitostatik, imunosupresan, dan steroid.
Bagaimana ini dilakukan
Imunisasi serum
Imunisasi serum melibatkan pengambilan darah sederhana dari pembuluh darah lengan. Serum diperoleh dengan sentrifugasi sampel biologis; ini memungkinkan, pada kenyataannya, untuk memisahkan fraksi yang mengandung sel (bagian sel hidup) dari cairan salah satu darah (plasma). Serum darah bebas dari faktor koagulasi (fibrinogen, faktor VIII, faktor V dan protrombin).
Imunisasi Saluran Kemih
Untuk melakukan imunisasi ulang urin, penting untuk mengumpulkan sedikit urine dalam wadah steril khusus. Berdasarkan indikasi dari dokter dan laboratorium, sampel dapat dikumpulkan tanpa waktu yang tepat ( acak ) atau dalam waktu 24 jam .
Perbaikan Imunsi dari Minuman Keras
Analisis ini membutuhkan pengambilan sejumlah kecil cairan serebrospinal, melalui penyisipan jarum, di dalam rongga tulang belakang ( lumbar puncture ).
persiapan
Imunisasi: bagaimana Anda mempersiapkan ujian?
- Sebelum pengambilan sampel darah, beberapa laboratorium mungkin mengharuskan Anda mengamati puasa setidaknya 10-12 jam. Selama waktu ini sejumlah kecil air diperbolehkan.
- Imunisasi dapat dilakukan pada urine yang dikumpulkan pada waktu tertentu (acak) atau selama 24 jam, sehingga perlu untuk mendapatkan wadah steril yang sesuai sebelumnya.
- Sedangkan untuk imunisasi ulang minuman keras, sebagai gantinya, tidak diperlukan persiapan khusus.
Apa yang bisa mengubah hasil ujian?
Beberapa obat dapat memengaruhi hasil perbaikan imun, sehingga disarankan untuk melaporkan terapi obat apa pun yang sedang berlangsung kepada dokter.
Dalam enam bulan sebelum pemeriksaan, pemberian vaksin (imunisasi) dan penggunaan obat-obatan, seperti fenitoin, prokainamid, kontrasepsi oral, metadon dan gamma globulin terapeutik, dapat meningkatkan konsentrasi imunoglobulin. Obat-obatan lain yang dapat mengubah hasil tes adalah kortikosteroid, neomisin, asam asetilsalisilat dan klorpromazin.
Interpretasi Hasil
Hasil perbaikan kekebalan dievaluasi dalam kombinasi dengan hasil analisis lainnya. Penafsiran temuan adalah tanggung jawab dokter umum atau spesialis referensi yang dapat mengidentifikasi dan membandingkan perubahan yang mempengaruhi gamma globulin spesifik (misalnya, pita yang bertepatan dengan imunoglobulin G) untuk penyakit tertentu. Evaluasi ini mengonfirmasi atau mendukung hipotesis diagnostik: secara umum, perbaikan kekebalan dapat mengungkapkan profil gamma globulin normal atau mengidentifikasi protein monoklonal atau model poliklonal .
Setelah penyakit didefinisikan, imunisasi ulang dapat dilakukan untuk:
- Pantau penyakit dari waktu ke waktu, kemudian ikuti jalannya (tindak lanjut);
- Periksa efektivitas protokol terapeutik .
Pro dan Kontra dari Perbaikan Imun
Dibandingkan dengan elektroforesis protein, perbaikan kekebalan:
- Lebih cepat : hasil imunisasi biasanya diperoleh dalam waktu tiga jam;
- Ini lebih sensitif (walaupun sedikit): imunoterapi dapat mengungkapkan imunoglobulin yang dikeluarkan dari elektroforesis protein, terutama pada konsentrasi rendah (kurang dari 1 gram / liter).
Selanjutnya, imunisasi ulang:
- Itu dapat sebagian otomatis ;
- Mudah dibaca dan diinterpretasikan .
Namun, imunisasi lebih mahal daripada elektroforesis protein dan hanya memungkinkan analisis gamma globulin .
Hasil normal
Dalam imunisasi ulang, jalur normal meliputi:
- Sebuah band yang bertepatan dengan immunoglobulin G ( IgG ) yang lebih gelap;
- Pita yang sesuai dengan imunoglobulin A ( IgA ) teringan;
- Tidak adanya pita untuk imunoglobulin M ( IgM );
- Pita kappa lebih rapat daripada band lambda (rantai ringan), dengan perbandingan 2: 1.
Dalam hasil normal, pita-pita itu besar dan ada pengurangan kerapatan warna secara bertahap dan seragam ke arah tepi pita imunoelektroforesis.
Gamma globulin poliklonal
Dalam beberapa kasus, semua pita imunoasiasi dikaburkan secara merata pada tingkat yang sama. Model ini mewakili keberadaan imunoglobulin poliklonal . Juga dalam kasus ini, pita-pita lebar dan transisi ke tepi strip immunoelectrophoretic bertahap. Pita IgM - biasanya tidak ada - lebar.
Globus gamma monoklonal
Ketika pita sempit dengan tepi tajam dapat diidentifikasi dalam rute imunisasi ulang, itu berarti bahwa pencarian komponen monoklonal adalah positif .
Identifikasi imunoglobulin monoklonal berguna dalam diagnosis kondisi berikut:
- Gammopathy monoklonal dengan signifikansi yang belum ditentukan (MGUS);
- Multiple myeloma;
- Makroglobulinemia Waldenstrom;
- Amiloidosis.
Lebih lanjut, imunofiksasi dapat digunakan untuk memantau terapi pada diskrasia sel plasma (mis. Multiple myeloma dan Waldenstrom's macroglobulinemia). Jika tingkat protein monoklonal menurun atau tidak terdeteksi setelah kemoterapi, itu mungkin menunjukkan respons terhadap pengobatan . Sebaliknya, protein monoklonal yang bertahan meskipun sudah diobati adalah tanda penyakit refraktori .
Mohon diperhatikan . Hasil imunisasi ulang negatif tidak selalu mengecualikan diskrasia sel plasma. Sebagai contoh, multiple myeloma atau oligosecretory non-sekretori dapat memberikan hasil negatif baik dalam urin dan serum. Oleh karena itu, jika kecurigaan diagnostik untuk gammopathy masih tinggi, penentuan rasio Kappa / Lambda Libere Light Chains ( rasio K / L ) diindikasikan.
Imunisasi dan diagnosis Multiple Sclerosis
Imunisasi cairan serebrospinal (cairan) diresepkan ketika dokter mencurigai adanya multiple sclerosis . Dalam hal ini, jalur yang ditentukan adalah karakteristik, karena jalur ini menyoroti keberadaan yang disebut pita oligoclonal . Hasilnya dilaporkan dalam laporan laboratorium sebagai positif . Harus dipertimbangkan bahwa pita-pita tersebut biasanya tidak diamati dalam perbaikan imun serum, karena berkorelasi dengan produksi gamma globulin intratekal .
Namun, perlu dicatat bahwa temuan ini tidak selalu mengkonfirmasi diagnosis, karena kondisi lain dapat terjadi dengan pita oligoclonal dalam cairan serebrospinal.
Dengan kata lain, identifikasi pita oligoclonal dengan imunoridasi cairan sangat berguna untuk mendukung diagnosis multiple sclerosis, tetapi harus dikonfirmasi oleh penyelidikan lain . Kondisi lain yang dapat memberikan hasil ini adalah radang sistem saraf pusat, termasuk: ensefalitis terkait HIV, neurosifilis, neurosarcoidosis, Lyme meningoencephalitis, keganasan SSP, neuromielitis optik, dan mielitis transversal.
